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Obtención del anti-CD45 conjugado con Isotiocianato de Fluoresceína

dc.contributor.authorRabell Velazque, Grisel
dc.contributor.advisorRodríguez Pérez, Dr. C. Suyén
dc.date.accessioned2023-12-08T13:43:42Z
dc.date.available2023-12-08T13:43:42Z
dc.date.issued2014
dc.identifier.urihttp://repositorio.uo.edu.cu/handle/123456789/1324
dc.descriptionEste documento es Propiedad Patrimonial de la Universidad de Oriente de Santiago de Cuba. Los autores conservan los derechos morales que como tal le son reconocidos por la Legislación vigente sobre Derecho de Autor. Los distintos Usuarios podrán copiar, distribuir, comunicar públicamente la obra y hacer obras derivadas; bajo las condiciones siguientes: 1. Reconocer y citar al autor original 2. No utilizar la obra con fines comerciales 3. No realizar modificación alguna a la obra 4. Compartir aquellos productos resultado del uso de la obra bajo la misma licencia de esta 5. Los Usuarios pueden reutilizar los metadatos en cualquier medio sin autorización previa, siempre que los propósitos de su utilización sean sin ánimo de lucro y se provea el Identificador OAI, un enlace al registro de metadatos original, o se haga referencia al repositorio de donde han sido extraídos Todo lo anterior está en correspondencia con las legislaciones vigentes sobre Derecho de Autor.es_ES
dc.description.abstractEl reactivo anti-CD45 conjugado con Isotiocianato de Fluoresceina (FITC) es util para el diagnostico y estudio de inmunodeficiencias de celulas T y B. En la actualidad, Cuba no cuenta con este marcador leucocitario, limitando la disponibilidad de este reactivo para el Sistema de Salud cubano. En la propuesta de obtencion de este marcador fueron ensayados tres protocolos modificando la relacion descrita entre el fluorocromo a conjugar y el anticuerpo (protocolo 2, 1:4,6; protocolo 3, 1:7), basado en la proporcion de Harlow, E. and Lane, D, (protocolo 1, 1:2). El anticuerpo IgG 1 murina (anti-CD45) fue purificado por cromatografia de afinidad a una pureza de 99,3%. Se evaluo la densidad optica del conjugado a 495 nm y 280 nm y el porciento de reconocimiento leucocitario para citometria de flujo. Los tres protocolos ensayados muestran buena actividad biologica con un porciento de reconocimiento leucocitario en el rango de 90,7%-96,8%, destacando el 2 que permite la obtencion del anti-CD45 conjugado con FITC a un menor costo de produccion y beneficio en comparacion con el precio del producto importado SIGMA. Este estudio permitio establecer el proceso de conjugacion para el anti-CD45 con FITC en el Laboratorio de Anticuerpos y Biomodelos Experimentales (LABEX), abriendo paso a la fase desarrollo del producto para asi alcanzar su posterior registro sanitario.es_ES
dc.description.sponsorshipThe reactive anti-CD45 is useful for the diagnostic and the study of T or B cells immunodeficiency. Nowadays, this leucocyte marker there is not in our country, limiting the availability of this reagent for Cuban Health's system. With the purpose to obtain this reagent were assayed three protocols, modifying the relation among the fluorocrom and the antibody (F:P) to conjugate (protocol 2, 1:4,6; protocol 3, 1:7), based in the proposal of Harlow and Lane (protocol 1, 1:2). The murine IgG 1 (anti- CD45) antibody was obtained by affinity chromatography with 99,3 % of purity. The optic density of the conjugated was evaluated to 495 nm and 280 nm and was obtained the leucocitary recognition percent through citometry of flow. The three tried protocols evidence good biological activity in the range (90,7%-96,8%), better 2 than others, which is obtained to lowest cost of production and better benefit compared to SIGMA product price. This study permitted establishing the process of conjugation to anti-CD 45 FITC conjugated in antibodies and biomodels experimentals Laboratory (LABEX), opening the phase product development for reaching his posterior sanitary register.es_ES
dc.language.isoeses_ES
dc.publisherCentro de Estudios de Biotecnologia Industrial. Universidad de Oriente. Cubaes_ES
dc.rightsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 3.0 España*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/es/*
dc.subjectANTICUERPOS MONOCLONALESes_ES
dc.subjectINMUNOFLUORESCENCIAes_ES
dc.subjectPRODUCCION DE ACM IN VIVOes_ES
dc.subjectPURIFICACION DE ACMes_ES
dc.subjectSISTEMA INMUNOLOGICOes_ES
dc.subjectMONOCLONAL ANTIBODIESes_ES
dc.subjectIMMUNOFLUORESCENCEes_ES
dc.subjectMCA PRODUCTION IN VIVOes_ES
dc.subjectACM PURIFICATIONes_ES
dc.subjectIMMUNE SYSTEMes_ES
dc.titleObtención del anti-CD45 conjugado con Isotiocianato de Fluoresceínaes_ES
dc.title.alternativeObtaining anti-CD45 conjugated with Fluorescein Isothiocyanatees_ES
dc.typeTesises_ES


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Name:
Tesis Grisel Rabell.pdf
Size:
1.569Mb
Format:
PDF
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