Sistemas basados en anticuerpos aviares y mamíferos para la detección por Inmunohistoquímicas del marcador tumoral Her2

Abstract

Los estudios recientes realizados con diversos biomarcadores de detección precoz del cáncer a nivel mundial han mostrado resultados controvertidos. Como parte de un esfuerzo a nivel internacional de mejorar su validación, se mantiene una incesante búsqueda de anticuerpos que los identifiquen, para ello se explotan diversas tecnologías para generar inmunoglobulinas específicas con este fin. En este trabajo nos propusimos obtener anticuerpos anti HER-2 a partir de la inmunización de aves y mamíferos, para utilizarlos como anticuerpos tanto primarios como secundarios, en un paquete diagnostico para estudios posteriores en muestras de tejido. Para ello se inmunizaron gallinas y conejos con aproximadamente 150 μg de la proteína Her-2 pura, obtenida por Cromatografía de Inmunoafinidad para la obtención de marcadores primarios, así como conejos para obtener las anti inmunoglobulinas Y de gallina como reactivo secundario, las que fueron marcadas con biotina. Como reactivo revelador en ambos sistemas se utilizo un complejo Streptavidina – FITC de una fuente comercial. Los resultados obtenidos en técnicas inmunohistoquimicas reflejan que el paquete diagnostico formado por anticuerpos IgY primario conjuntamente con la IgG de conejo anti IgY, revelo ser mas sensible y especifico que su similar constituido exclusivamente por inmunoglobulinas de mamíferos, lo que nos sugiere que la Tecnología IgY puede constituir una vía para un suministro estable y consistente de anticuerpos primarios para la producción de paquetes reactivos con estos fines.